各種細菌所具有的酶系統(tǒng)不盡相同，對營養(yǎng)基質的分解能力也不一樣，因而代謝產(chǎn)物存在差別。以此用生理生化試驗的方法檢測細菌對各種基質的代謝作用及其代謝產(chǎn)物，從而鑒別細菌的種屬，稱之為細菌的生理生化反應，締一生物為您介紹幾種細菌鑒定中常見的生理生化反應原理：

糖（醇）類發(fā)酵試驗

不同的細菌含有發(fā)酵不同的糖（醇）的酶，因而發(fā)酵糖（醇）的能力各不相同，產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物也不同：有的產(chǎn)酸產(chǎn)氣，有的產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。指示劑溴甲酚紫，pH5.2黃色—pH6.8紫色，當發(fā)酵產(chǎn)酸時，培養(yǎng)基將由紫變黃。產(chǎn)氣可由杜氏小管中有無氣泡來證明。

甲基紅試驗（M.R試驗）

甲基紅試驗，pH4.4紅色～pH6.2黃色，是用來檢測由葡萄糖產(chǎn)生的有機酸，如甲酸、乙酸、乳酸等。有些細菌分解糖類產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸進一步反應形成甲酸、乙酸、乳酸等，使培養(yǎng)基的pH降低到4.2以下。有些細菌在培養(yǎng)的早期產(chǎn)生有機酸，但在后期將有有機酸轉化為非酸性末端產(chǎn)物，如乙醇、丙酮酸等，使pH升至大約6。

Voges-Proskauer試驗（伏-普試驗，V.P.試驗）

伏-普試驗是用來測定某些細菌利用葡萄糖產(chǎn)生非酸性或中性末端產(chǎn)物的能力。某些細菌分解葡萄糖成丙酮酸，再將丙酮酸縮合脫羧成乙酰甲基甲醇。乙酰甲基甲醇在堿性條件下，被氧化為二乙酰，二乙酰與培養(yǎng)基中所含的胍基作用，生成紅色化合物為V.P.反應陽性。

4.靛基質試驗

某些細菌，如大腸桿菌，能產(chǎn)生色氨酸酶，分解蛋白胨中的色氨酸，產(chǎn)生靛基質，靛基質與對二甲基氨基苯甲酸結合，形成玫瑰色靛基質。

硫化氫試驗

某些細菌能分解含硫的氨基酸，產(chǎn)生硫化氫，硫化氫與培養(yǎng)基中的鐵鹽反應，形成黑色的硫化鐵沉淀，為硫化氫試驗陽性。

6.明膠液化實驗

明膠在25度以下可維持凝膠狀態(tài)，以固體狀態(tài)存在，而在25度以上時明膠就會液化。有些微生物可產(chǎn)生一種成為明膠酶的胞外酶，水解這種蛋白質，而使明膠液化，甚至在4度仍能保持液化狀態(tài)。

檸檬酸鹽利用試驗

有的細菌如產(chǎn)氣桿菌，能利用檸檬酸鈉為碳源，因此能在檸檬酸鹽培養(yǎng)基上生長，并分解檸檬酸鹽后產(chǎn)生碳酸鹽，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性。此時培養(yǎng)基中的溴麝香草酚藍指示劑pH6.0(黃)～7.6(藍)，由綠色變?yōu)樯钏{色。

淀粉水解實驗

細菌水解淀粉的過程可以通過底物的變化來證明，即用碘測定不再產(chǎn)生藍色。

細菌的生理生化試驗，是菌種鑒定的關鍵性試驗，但傳統(tǒng)試驗方法存在耗時耗力，時間過程較長；需要試劑、耗材、儀器較多等缺點。上 HiMedia公司（微生物公司）生產(chǎn)的HiBio-ID™微生物生化鑒定試劑卡（盒），較好的解決了這一問題。

以上所提到的實驗，均可采取試劑盒的檢測方法，HiBio-ID™微生物生化鑒定試劑卡（盒），一個生化鑒定卡上集成了12種或24種生化試驗，無需借助其他儀器，可一次性出結果，鑒定卡的選擇依賴于各種因素，如在選擇性鑒別瓊脂上的生長狀況、生長時間、菌落特征、革蘭氏染色等。

HiBio-ID™微生物生化鑒定試劑卡（盒）試劑盒目前有20多種，能檢測葡萄球菌、芽孢桿菌、沙門氏菌、腸桿菌、乳桿菌等多種菌種。

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