公车上拨开丁字裤进入电影,久久99精品久久久久久无毒不卡,国产丰满老熟妇乱XXX1区,夜夜爽妓女8888视频免费观看

當前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  支原體常規(guī)檢測方法匯總(之一)

支原體常規(guī)檢測方法匯總(之一)

更新時間:2021-11-22  |  點擊率:652

養(yǎng)細胞的小伙伴,最怕遇到的,大概就是細胞污染了。

這細菌和真菌污染好辨別,處理起來雖然麻煩,但也不是毫無辦法。相比起來,支原體污染才是防不勝防。

顯微鏡很難捕捉到它們的身影,與細胞共存在同一培養(yǎng)體系下,還跟細胞搶吃搶喝??蓱z弱小又無助的細胞根本不是支原體的對手,只能茍延殘喘,狀態(tài)一代不如一代,導致實驗結(jié)果出現(xiàn)偏差。


多數(shù)情況下,發(fā)現(xiàn)細胞疑似支原體污染,直接丟掉然后清理環(huán)境即可。但在一些特殊實驗,比如:細胞保種、抗體藥生產(chǎn)、疫苗生產(chǎn)或是細胞治療過程中,則需要對細胞例行支原體檢測,以確保細胞的純凈。

支原體常規(guī)檢測法之經(jīng)典法


這里指的是基于經(jīng)典法試劑盒:Venor®Gem qEP的檢測方法。


關(guān)于qPCR大家應(yīng)該都不陌生:

實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)

支原體常規(guī)檢測方法匯總(之一)


是一種在DNA擴增反應(yīng)中,以熒光化學物質(zhì)測每次聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。通過內(nèi)參或者外參法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。


在支原體經(jīng)典法檢測試劑盒中,無需RNA提取和反轉(zhuǎn)錄步驟,樣品僅需待檢測的細胞上清或是從上清中提取的DNA。


經(jīng)典法試劑盒:Venor®Gem qEP使用方法


一、樣品制備:


①濃縮:當細胞長至90%時,即可收集上清開始檢測,可對樣品進行適當濃縮。

注:濃縮僅適用于支原體的完整性,避免濃縮前支原體被破壞(如熱滅活)。


②穩(wěn)定:細胞培養(yǎng)樣品可能含有豐富的DNA酶,在低溫下也能降解支原體DNA。因而推薦進行樣品穩(wěn)定化處理。如果立即進行DNA抽提,則忽略這一步。


③DNA 抽提:大量證據(jù)表明,DNA抽提可實現(xiàn)最高的靈敏度。DNA抽提有多種方法,但應(yīng)適合支原體基因組。我們推薦:


Venor®GeM Sample Preparation kits (貨號56-1010/-1050/-1200) 適合手動DNA抽提

這些DNA抽提試劑盒已經(jīng)過大量驗證,具體流程參見試劑盒說明書。另外Venor®GeM qEP kit包含的內(nèi)控DNA對照,也用于驗證DNA抽提步驟(內(nèi)控原理:已知濃度的細胞,包含內(nèi)部控制DNA序列,該序列不和現(xiàn)有的任何有機體序列同源,對檢測的DNA樣品干擾極小。在DNA提取前,將該內(nèi)控細胞和樣品一起加入細胞裂解液中,被一起提取出來。和靶點樣品一起進行熒光定量PCR實驗,內(nèi)控DNA序列的成功擴增提示靶點DNA的提取成功)。


二、試劑制備與PCR



另外,下列儀器已經(jīng)通過PCR反應(yīng)驗證:


三、試劑制備與PCR


FAM通道檢測支原體熒光信號。依據(jù)DNA標準曲線和Ct值定量。具體步驟需參考具體qPCR 儀及軟件的功能。我們推薦對包括對照在內(nèi)的每個樣品的擴增曲線進行評估。


Ct<40為陽性結(jié)果。Ct≥40為陰性結(jié)果。支原體DNA和內(nèi)控DNA存在信號的競爭性抑制。支原體DNA越多,F(xiàn)AM通道信號越高,檢測內(nèi)控對照的HEX通道信號越低。


關(guān)于經(jīng)典法qPCR檢測支原體的方法今天就介紹到這里啦,了解更多商品詳情可以點擊下方圖片,進入我們的*商城,也可點擊文末的閱讀原文,瀏覽*網(wǎng)站~


极品新婚夜少妇真紧| 少妇无码久久一区二区三区| 成人午夜精品无码区久久| 久久99精品久久久久久水蜜桃 | 免费无码又爽又刺激A片涩涩软件 午夜精品久久久久久久久 | 99久久免费国产精品| 成全视频在线观看免费| 亚洲免费在线观看| 阿娇张开双腿实干十三分钟| 一区二区视频| 又白又嫩毛又多12P| 久久久AV精品波多野结衣| 欧美放荡办公室VIDEOS按摩| 日产精品一区二区| 野花日本HD免费高清版1| 日本人真人姓交大视频| 精品久久久久久久免费人妻| 玩弄人妻少妇500系列| 少妇干柴烈火肉欲小说| 漂亮人妻洗澡被公强| 少妇真人直播app| 久久ER99热精品一区二区| 1区2区3区产品乱码免费| 久别的草原在线看视频免费 | 国产偷窥盗拍丰满老熟女| 少妇被大黑捧猛烈进出动态图| 亚洲精华国产精华液| 偷拍真实夫妇作爱视频| 无码办公室丝袜OL中文字幕| 性生交大片免费看淑女出招 | 人妻被按摩到潮喷中文字幕| 中文字幕乱码中文乱码| 少妇风流做爰全过程69| 色欲狠狠躁天天躁无码中文字幕 | 办公室艳妇潮喷费蜜桃AV| 息与子五十路孕中文字幕| 麻豆国产AV超爽剧情系列| 老司机福利导航| 人妻女教师耻辱の教室| 欧美人与鲁交大毛片免费| 国产L精品国产亚洲区久久|